液氮研磨的應(yīng)用原理及注意事項

　　原理

　　分子生物學(xué)是當前生命科學(xué)領(lǐng)域的前沿學(xué)科,其理論與技術(shù)已滲透到各學(xué)科領(lǐng)域,而分子生物學(xué)實驗在生命科學(xué)研究中顯得相當重要。在實際工作中,許多實驗材料比如動物身上的肌肉組織、結(jié)締組織、骨組織、毛發(fā)組織等,植物的根、莖、葉、種子等均需磨碎,隨后才能對其成分、基因與蛋白質(zhì)及結(jié)構(gòu)和功能進行研究。

　　液氮研磨在分子生物學(xué)實驗中應(yīng)用廣泛,特別是有關(guān)核糖核酸(RNA)、脫氧核糖核酸(DNA)的分離。液氮的溫度為一196℃,它既能使各種組織成分不易被破壞或降解,又能使組織變硬,脆性增加易于磨碎。正是由于液氮的溫度極低,操作時要特別小心。液氮研磨，一是為了終止細胞內(nèi)外一切生物反應(yīng)，比如提取RNA時，防止RNA酶的降解反應(yīng)等；還有一個原因，就是在液氮中的細胞*凍硬了，研磨可以達到很好的破胞效果，將細胞磨成粉，使里邊的物質(zhì)釋放出來。

　　液氮研磨注意事項：

　　1、把樣品放入研缽中，倒入少量液氮，液氮就會像沸騰了一樣，這時候迅速研磨。動作一定不要太大，最好是用手心的力量往下旋轉(zhuǎn)著碾碎，動作太大會把樣品濺飛，如果樣品量很少直接就可能磨沒了。大約幾秒沸騰就結(jié)束，再磨幾下就可以再加入點液氮，重復(fù)以上過程，直到認為磨得比較細了為止。

　　2、液態(tài)氮在常壓時的溫度相當?shù)牡停坏┡c物體表面接觸將迅速地沸騰，同時也會帶走相當大量的熱能。因此，使用液態(tài)氮時須額外注意，避免與皮膚的直接接觸。

　　3、裝填時應(yīng)穿戴護具，如：防凍手套。切忌使用棉質(zhì)手套，棉質(zhì)手套會借由毛細現(xiàn)象吸著大量的液態(tài)氮而提高凍傷的可能性(甚至比不穿戴還要危險)。